适用 Beacon AFM1*亲合柱用于浓缩和纯化牛奶中AFM1残留物,以便于荧光、色谱以及*分析。 检测原理 Beacon AFM1*亲合柱含有特异性抗体紧密附着在载体上,这些抗体可以**结合牛奶中的AFM1,脱 脂后牛奶过柱,接下来未结合的物质被清洗掉,用甲醇:乙腈(2:3)洗脱联结在抗体上的AFM1待分 析。 注意 1. 过期试剂不能使用。 2. 使用前所有试剂回温到室温下(20-28℃)。但避免在室温下放置时间过久(>24小时)。 3. AFM1为剧毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器 具必须在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1小时,戴上手套以避免皮肤及黏膜与试剂或样品萃取物接 触,如果一旦接触,必须立即用大量水冲洗。 所需材料(不提供) 1. 实验室级蒸馏水或去离子水 2. 甲醇:色谱纯 3. 乙腈:色谱纯 4. 10%甲醇/水:在900ml水中加入100ml甲醇 5. 甲醇:乙腈(2:3):在20ml甲醇中加入30ml乙腈 样品准备 1. 牛奶:称取50g牛奶到具塞离心管中,在水浴中加热到35-37℃,4000转离心15min,除去上层乳脂, 全部样品过柱净化。 2. 奶粉:称5g样品,加入50ml预热到50℃的纯净水,混合均匀,4000转离心15min,除去上层乳脂,全 部样品过柱净化。 3. 酸奶或乳酸类饮料:取50g样品,用0.5mol/L的NaOH调节PH值到6.8-7.2左右,4000转离心15min, 除去上层乳脂,全部通过*亲和柱。 样品过柱净化 1. 将*亲和柱连接于10ml或50ml注射器下。 2. 将处理好的样品全部通过*亲和柱。 3. 以10mL10%甲醇/水淋洗柱子两次,弃去全部流出液,并使2mL-3mL空气通过柱体。 4. 准确加人1.0mL甲醇:乙腈(2:3)洗脱,流速为1mL/min-2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中, 供检测用。